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梁艺飞 先生
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发布时间:2022-01-23 18:58:27
低温生物***——筛选模型
根据不同的筛选目的,采用不同的筛选模型。如常规筛选产生菌的方法是将土壤中分离所得的纯种,在含有琼脂培养基的平皿上培养后,用打孔器将菌块移至含有试验菌的琼脂培养基上,在适宜的温度下培养一定时间后取出,如在菌块的周围有透明的抑菌圈,则表明此***具有产生***试验菌生长的抑菌物质的能力。所得***经过摇瓶液体发酵,选出生产能力高的***。另一方面对所提取的进行结构分析、药理试验及临床试验等,确为有效者,即可作为生产***。又如筛选脂肪酶生产***的方法是将分离所得的霉菌涂布于含有牛脂的琼脂培养基上,恒温培养一定时间,如菌落周围出现透明圈的,则该菌具有分解脂肪的能力,进一步作摇瓶发酵测定酶活力,挑选产量高者作生产***的出发菌株。
低温生物***——***分离方法
寄主分离法即从生长有某种***的寄主体上(如茯苓、木耳木段)取下木片,进行分离的方法。如木耳制种时,可选朵大、出耳多、质厚的耳棒(即长有木耳的木段)。采集后,削去耳根下的树皮,将其横断面锯成1 厘米厚的木片,在无菌条件下,切去无耳菌丝部分,留下有耳菌丝部分,浸入水中1 分钟,取出再用无菌水冲去木片上的液体。然后,用解剖刀将木片切成0 . 5 厘米的小块,放入斜面培养基内,置24 ~26 ℃下培养,及时淘汰杂菌,选取纯菌丝进行移植培养,即得***。
低温生物知多少?
实验室的传代保藏过程
1. 按说明书要求复溶菌粉,转种于适当的增菌培养基内(G1),复壮后转接至平板上,并于适当温度下培养适当时间,分离出单个纯种菌落,此为第2代(G2)。
2. 鉴定完成后,挑取纯菌落制成浓菌悬液用于制备甘油冷冻管,同时挑取纯菌落转接斜面作为工作用。此时,保藏为第2代,但工作用则为第三代。
3. 将第2代管冷冻保存,将工作用于适当温度下培养适当时间后可用于试验。
4. 取一支冷冻保存的G2代转种于平板和斜面培养基上,平板上的制成冷冻保藏管第三代(G3),斜面培养基经适当温度下培养适当时间后用作工作用(W3)。
5. 将第三代(G3)冷冻或低温保存,将生长、转种后的G2经灭菌处理后丢弃。
6. 当工作用代数小于5时,可直接用上一代工作用转接下一代工作用,如W3可直接转接为W4。
7. 按上述程序操作,直至G4转为W5为止,需重新开启安瓿,再重复上述操作程序、保藏和使用。
以上方法中,被分为两类。传代用和工作用,传代用用于甘油冷冻管法保藏,工作用用斜面低温保藏法保藏。
实验证明,甘油冷冻管的有效期至少为2年,但其主要适用于***(需氧)、酵母菌的传代、保藏、***和芽孢类***则需应用其它方法。
生物***存活必备条件
1、保持土壤合理湿度
高温闷棚前,菜农多进行土壤翻耕,使得浇水水量极大,土壤湿度过高,通透性差,影响生物菌的增殖。因此,闷棚浇水时,要先起垄,浇小水保证土壤较为湿润即可,不要大水漫灌。
2、闭棚后不要立即升温
底肥需要生物菌发酵,若翻入土壤后立即浇水升温,多数***被扼杀,仅有少量嗜热菌可以存活,但粪肥发酵仅靠嗜热菌是完成不了的。
建议菜农翻地浇水后间隔几天,待土壤湿度降低,生物菌大量繁殖后再覆盖地膜、关闭通风口进行闷棚,此时低温***已经发挥作用,可以产生大量热量辅助闷棚,可大大改善闷棚效果。
3、促进生物菌快速繁殖
想要促进微生物快速增殖,可使用***含量高的菌剂,例如20亿的,可充分发挥菌剂作用。菜农要学会换位思考,生物菌喜欢什么样的条件,就创造什么样的条件,如此才能确保闷棚效果。
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